10.3969/j.issn.1004-616X.2009.06.002
靶向血栓蛋白(RGD)_3-tTF与肿瘤血管标心志物α_vβ_3特异性结合能力的研究
背景与目的:研究靶向血栓蛋白(RGD)_3-tTF.融合蛋白结合肿瘤血管标志物整合素α_vβ_3的能力,旨在探讨融合蛋白的RGD多肽数量和化学结构与其结合整合素α_vβ_3能力的关系及其意义. 材料与方法:用3个串联的RGD多肽与截短组织因子(truncated tissue factor,tTF)合成融合基因rRGD),-tTF,表达于大肠杆菌(E.coli)BL21(DE,),用镍柱纯化融合蛋白.通过凝血实验检测融合蛋白tTF组分的活性,运用间接酶联免疫吸附试验(ElJSA)分析其特异性结合整合素α_vβ_3的能力.并与RGD-tTF融合蛋白的活性进行比较.结果:(RGD)_3-tTF与RGD-tTF融合蛋白凝血活性相似(F=0.019,P>0.05),但(RGD)_3-tTF融合蛋白特异性结合整合素α_vβ_3的能力明显升高(F=140.17,P<0.01).当融合蛋白浓度为0.24 μmol/L时,(RGD)_3tTF融合蛋白的OD_(405nm)值是RGD-tTF融合蛋白的1.32倍(1.25/0.95).结论:(RGD)_3-tTF融合蛋白带有两个二硫键和3个RGD多肽,保留了组织因子凝血活性的同时,提高了与整合素α_vβ_3特异性结合的能力,为开展选择性肿瘤血管血栓靶向治疗的动物实验奠定了基础.
RGD、tTF、靶向血栓蛋白、整合素α_vβ_3
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R73-3(肿瘤学)
厦门市卫生局科研项目wsk0509
2010-03-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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