应用毕赤酵母系统表达人Fascin蛋白

摘要：

背景与目的:应用酵母表达系统表达人的重要肿瘤分子标志物fascin蛋白.材料与方法:利用分子克隆技术将fascin基因完整编码区克隆至毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达载体pPIC9中,获得重组质粒pPICg-fascin;以限制性内切酶Mss I进行线性化并转化毕赤酵母GS115菌株,用PCR方法筛选出阳性整合克隆;对阳性克隆进行0.5%甲醇诱导表达重组蛋白,银染及Western blot检测培养上清中fascin重组蛋白的表达情况.结果:毕赤酵母能够分泌表达约69 kD的fascin重组蛋白,表达量为40 μg/L.结论:毕赤酵母可以分泌表达fascin蛋白,但由于分泌表达量较低,尚达不到工程化要求.

关键词：fascin蛋白、毕赤酵母、分泌表达、pPIC9载体

所属期刊栏目：20

分类号：Q786;R735.1(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高新技术研究发展计划2006AA02A403;国家自然科学基金资助项目30672376,30772485;广东省自然科学基金重点项目5104541.7118419

在线出版日期：2009-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：432-436