Hes 1基因诱导小鼠肝原始细胞分化为胆管上皮细胞

摘要：

背景与目的:采用体外获得性表达外源发状分裂相关增强子-1(hairy and enhancer of split 1,Hes 1)基因的方法,探讨Hes1在肝干细胞分化以及胆管上皮细胞发育中的作用.材料与方法:通过PCR方法从小鼠基因组中克隆Hes1基因片段,构建表达载体pEGFP-C1-Hes1和pcDNA3.1.Hes1,将2种表达载体分别转染肝原始细胞系(LEPCs),应用RT-PCR和Real-time PCR技术检测胆管细胞分子标志物CK19、GGT,胆管上皮细胞相关转录因子HNF6、HNFIB,肝细胞分子标志物Gs、BGP和肝卵圆细胞的分子标志物Thy-1的表达,并在荧光显微镜下观察EGFP标记的LEPCa细胞系荧光强度的变化.结果:成功构建表达载体pEGFP-C1-Hes1和pcDNA3.1-Hes1.RT-PCR和Real-time PCR检测均表明胆管细胞分子标志CKl9、GGT表达量上调;胆管上皮细胞相关转录因子HNF6、HNF1B表达上调;肝细胞分子标志GS、BGP表达量下调;卵圆细胞的分子标志Thy-1表达量下调;LEPCs细胞系绿色荧光增强.结论:初步证明小鼠肝原始细胞经Hes1的表达诱导后可向胆管上皮细胞方向分化,推测Hes1为胆管上皮细胞分化的转录调控因子.

关键词：Hes1、肝原始细胞、分化、胆管上皮细胞

所属期刊栏目：20

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：原国家自然基金项目30470876,30600326,30472141;国家863计划项目2006AA02Z474;上海重点基础科学计划研究项目03DJ14020,06W14001

在线出版日期：2009-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：424-428