10.3969/j.issn.1004-616X.2006.01.003
RNA干扰诱导DNA修复基因hMGMT表达沉寂的研究
背景与目的:构建能特异诱导人DNA修复基因hMGMT表达沉寂的RNA干扰载体.材料与方法:通过两步法聚合酶链反应(Polymerasing chain reaction,PCR)扩增hMGMT特异RNA干扰表达盒,连入质粒载体构建RNA干扰质粒pU6-MGMTi,与pGEFP-C1共转染人支气管上皮16HBE(Human bronchial epithelial)细胞,G418筛选后,采用RT-PCR和Western Blot分别检测mRNA和蛋白水平的表达抑制情况.结果:成功构建hMGMT特异RNA干扰质粒pU6-MGMTi,转染16HBE细胞的mRNA和蛋白表达受到显著的抑制.结论:应用RNA干扰表达盒以及共转染技术,构建MGMT基因表达沉寂的细胞株,为进一步阐明MGMT基因的功能创造条件.
hMGMT基因、RNA干扰、16HBE
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Q342+.3;R730.1(遗传学分支学科)
中国科学院资助项目30371196;30200235;广东省科技攻关项目2002B30104;广东省医学科研项目B2001075
2006-03-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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