RFP标记的 YCD 基因在 HeLa 细胞中的表达及其介导的细胞毒性

摘要：

背景与目的:探讨红色荧光蛋白标记的酿酒酵母菌胞嘧啶脱氨酶 (YCD)基因在人宫颈癌细胞 (HeLa细胞)中的表达及其功能.材料与方法:采用基因重组技术构建含有 CMV启动子和 RFP、YCD基因开放阅读框 (ORF)的真核表达载体 pIRES-YCD,脂质体法转染 HeLa细胞.荧光显微镜下观察转染细胞中红色荧光蛋白的表达,流式细胞术分析转染效率及荧光强度并筛选荧光阳性细胞,命名为 HeLa-Y.以不同浓度的前药 5_FC处理 HeLa-Y细胞, MTT法检测细胞存活率.结果: 荧光显微镜下可见红色荧光蛋白在 HeLa-Y细胞中表达,流式细胞术成功筛选出 HeLa_Y细胞.前药 5-FC能明显杀伤 HeLa-Y细胞, 5_FC浓度与 HeLa-Y之间存在对数曲线关系.结论: RFP可作为报告基因快速筛选 YCD表达载体转染的细胞, YCD/5-FC自杀基因系统可以进一步用于肿瘤的基因治疗研究.

关键词：红色荧光蛋白、酿酒酵母菌胞嘧啶脱氨酶、自杀基因、报告基因、基因表达

所属期刊栏目：16

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金39870710,30172437

在线出版日期：2004-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：272-275