Dynein抑制剂对卵母细胞体外成熟及cyclinB1 mRNA水平的影响

摘要：

背景与目的:胞浆 Dynein(动力蛋白)做为微管负极方向的马达蛋白在细胞增殖进程中发挥重要作用.本实验采用原钒酸钠特异抑制 Dynein生物活性后,观察卵母细胞体外培养成熟率和cyclinB1基因转录水平变化,探讨 Dynein功能异常对卵母细胞成熟分裂进程的影响及相关机制.材料与方法:应用卵母细胞体外培养成熟技术、半定量RT_PCR和单细胞RT_PCR方法,分别检测加入 Dynein抑制剂前后卵母细胞成熟率和cyclinB1基因转录水平的变化.结果:12 h量效实验结果证实,不同浓度原钒酸钠作用后,5 μmol/L原钒酸钠即可明显降低小鼠卵母细胞成熟率,0～400 μ mol/L卵母细胞成熟率随着剂量的增加而显著减少;同时检测发现,50～500 μ mol/L原钒酸钠组卵母细胞cyclinB1 mRNA表达呈剂量依赖性增加.时程结果表明,卵母细胞与400 μmol/L原钒酸钠作用 1 h 以上,卵母细胞成熟率明显减少;体外分别培养4 h或 8 h后再放入含有原钒酸钠培养基中培养至 12 h,仍可明显抑制卵母细胞第一极体排放. 400 μ mol/L原钒酸钠作用后,卵母细胞内 cyclinB1 mRNA时程表达水平与对照组相比,呈明显反向变化.结论: Dynein抑制剂诱导体外培养的卵母细胞减数分裂阻滞,成熟促进因子 (MPF)活性改变可能是 Dynein功能丧失后引起减数分裂停滞的一个机制.

关键词：动力蛋白、卵母细胞、细胞周期素 B1、原钒酸钠

所属期刊栏目：16

分类号：Q27(细胞生物物理学)

资助基金：国家自然科学基金30170481;广东省博士启动基金04300440

在线出版日期：2004-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：267-271