酵母单杂交诱饵质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF的构建与鉴定

摘要：

目的:构建可以与酵母染色体组发生重组的质粒pHis-NF和pLacZ-NF. 方法:人工合成44 bp的三重NF-κB元件寡聚核苷酸,通过DNA重组技术将靶序列NF-κB串定向插入细菌-酵母穿梭质粒pHisi和pLacZi的多克隆位点MCS后,用特异性酶切、琼脂糖凝胶电泳、PAGE电泳、DNA测序等方法进行鉴定. 结果:PAGE电泳和DNA测序分析证实定向插入的寡聚核苷酸串与预先设计的插入序列一致. 结论:成功地构建了重组质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF,为借助酵母单杂交实验技术平台深入探讨NF-κB因子相关基因的转录调控机制奠定了实验材料和技术基础.

关键词：核转录因子、NF-κB、pHis-3NF、pLacZ-3NF、酵母单杂交

所属期刊栏目：15

分类号：Q785;R735.1(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金39900069,30170428;广东省自然科学基金990799,010431;广东省高校自然科学基金200033;广东省医药卫生科研项目A2001419;汕头大学校科研和教改项目L0004,L00012

在线出版日期：2004-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：13-16