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10.3969/j.issn.1004-616X.2001.04.110

110. 维生素B6对H22小鼠肝癌细胞的细胞毒作用

引用
目的:研究维生素B6(吡哆醇)对体外培养的H22小鼠肝癌细胞的细胞毒作用。方法:①细胞培养:H22小鼠肝癌细胞生长于含15%灭活小牛血清、 100 μ/ml青霉素和100 μg/ml链霉素的DMEM完全培养基中,置37℃、5%CO2的细胞培养箱内培养;②MTT(噻唑蓝)法检测14种化疗药物对H22细胞的细胞毒作用;③不同浓度的维生素B6对H22细胞的作用:预先将盐酸吡哆醇(PN*CL)用无血清培养基配制成20 mmol/L、30 mmol/L、40 mmol/L、60 mmol/L的贮存液-20℃保存备用。各试验组终浓度分别为2 mmol/L、3 mmol/L、4 mmol/L、6 mmol/L,MTT法测定PN的细胞毒性;④维生素B6作用不同时间对H22细胞细胞毒性的影响:分别于培养24 h、48 h、72 h终止反应读取结果。统计学处理采用方差分析和Q检验。结果:按照相对抑制率IR%=1-试验组OD值/对照组OD值×100%的公式计算各种药物的抑制率,以IR<30%为不敏感、30%≤IR≤50%为敏感、 IR≥50%为高度敏感作标准,对H22细胞高度敏感的有Ara-C(77%)和ICTX(74%);敏感的有HRT(36%)、VP-16(31%)、CBDCA(42%)、eADM(45%);其余均不敏感(IR=-14%至22%),因此作者选择1×105/ml细胞浓度作为本实验的基础,并从敏感药物中选择卡铂作为阳性对照。试验②中各实验组平均OD值(以±s表示)依次为0.775±0.028,0.666±0.046,0.579±0.038,0.469±0.041,而阴性对照组平均OD值为1.055±0.072,实验组对阴性对照组的IR%随给药浓度的增加而增加(26.5%,36.8%,45.1%和55.6%,P<0.01),而且终浓度为3 mmol/L的吡哆醇与终浓度为13.9 μg/ml的阳性对照卡铂的细胞毒作用相当,IR值均为36.8%,而PN终浓度为4 mmol/L时与浓度为31 μg/ml的eADM的作用相当。从所做的药物剂量-效应曲线上可知IC50=5 mmol/L。此外,药物与细胞接触的最初24 h各组平均OD值无明显差别(0.81±0.066;0.86±0.02;0.853±0.023;0.797±0.105;P>0.05),培养48 h(平均OD=0.775±0.028;0.666±0.046;0.579±0.038;0.469±0.041)和72 h(平均OD=0.74±0.086;0.50±0.046;0.42±0.062;0.32±0.02)后平均光密度值随给药浓度增加而增加,各组之间有显著差别(P<0.01)。结论:维生素B6对体外培养的H22小鼠肝癌细胞的生长具有抑制作用,二者之间有剂量、时间依赖性关系,其抑癌作用同抗癌药eADM(31μg/ml)对H22细胞的抑制作用基本相当。

维生素B6、体外的、小鼠、肝癌、MTT法、吡哆醇

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R73(肿瘤学)

2004-03-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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