108. P53反义RNA抑制肝细胞癌生长的研究

摘要：

目的：针对突变型P53基因的致癌性，采用反义RNA技术以阻断肝细胞内源突变型P53的表达，研究对肝癌细胞生长的影响，为肝癌基因治疗提供可靠的理论基础。方法：采用定向克隆法将人野生型P53基因cDNA反向插入到哺乳动物表达载体PCR3．1的EcorRⅠ和XbaⅠ位点，构建了反义PCR3.1-P53(AS)表达载体。用免疫组化法鉴定Bel-7402肝癌细胞株为内源P53突变株，用脂质体转染法将PCR3．1-P53（AS）、PCR3．1空载体导入Bel7402细胞中，同时设Bel7402细胞对照组。用MTT法测定细胞的生长、用FCM测定细胞周期的变化。结果：转入PCR3．1-P53（AS）Bel7402细胞生长明显受到抑制，而转入PCR3．1的Bel7402细胞生长与对照组Bel7402细胞之间差异不大；FCM结果也表明转入PCR3.1-P53（AS）的细胞的生长明显被阻滞于G0／G1期，而其他两组之间则相差不大，表明可能P53反义RNA对肝癌细胞突变型P53表达的阻断，肝癌细胞显示出正常方向逆转迹象。结论：本研究结果表明，肝细胞癌内源突变型P53的表达被反义RNA抑制后，细胞增殖速度显著下降，FCM的结果也证明细胞部分受阻于G0／G1期，显示了向正常方向逆转的迹象。此研究结果即为肝癌发生提供理论基础，也为肝癌基因治疗提供新思路。

机标关键词：肝癌细胞株、细胞生长、突变型、肝癌基因治疗、表达载体、脂质体转染法、内源、肝细胞癌、对照组、免疫组化法、增殖速度、显示、细胞周期、人野生型、理论、基础、肝癌发生、定向克隆、测定、哺乳动物

所属期刊栏目：13

分类号：R73-36(肿瘤学)

在线出版日期：2004-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：269-270